ALKALICZNA WODA SALINOWA PEPTONOWA (ISO)
Kod: CM1117
pożywka bulionowa do wzbogacania gatunków Vibrio z próbek żywności i wody; ten preparat jest zgodny z ISO / TS 21872-1 i 2: 20071,2
Typowa formuła * g / litr
Pepton 20,0
Chlorek sodu 20,0
pH 8,6 ± 0,2 przy 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Rozpuścić 40 g w 1 litrze wody destylowanej. Dobrze wymieszaj i rozprowadź w końcowych pojemnikach. Sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut.
Opis
Woda peptonowa z alkaliczną solą fizjologiczną (ASPW) została po raz pierwszy opracowana przez Shread, Donovana i Lee3 w celu użycia jej jako nieselektywnego bulionu wzbogacającego do hodowli gatunków Aeromonas. Cruickshank poinformował, że podwyższone pH pożywki można wykorzystać do efektywnej hodowli gatunków Vibrio4. Pożywka wykorzystuje zdolność gatunków Vibrio do tolerowania warunków alkalicznych i wysokich poziomów chlorku sodu.
Technika
Do wykrywania Vibrio parahaemolyticus i Vibrio cholerae
Poniżej znajduje się przegląd ISO / TS 21872-1: 20071 - Horyzontalna metoda wykrywania potencjalnie enteropatogennego Vibrio spp. Część 1: Wykrywanie Vibrio parahaemolyticus i Vibrio cholerae. Przygotuj próbki zgodnie z ISO 6887 (odpowiednia część) 5, ISO 72186 i ISO 82617.
Dodaj xg próbki do 9 x ml lub 9 x g ASPW (ISO) w temperaturze otoczenia.
Inkubować przez 6 ± 1 godzinę w 41,5 ± 1 ° C dla świeżych produktów lub 37 ± 1 ° C dla głęboko mrożonych / solonych produktów.
Usunąć 1 ml inkubowanego podłoża i zaszczepić świeżym 10 ml alkalicznej wody peptonowej soli peptonowej (ISO) i inkubować przez 18 ± 1 godzinę w 41,5 ° C.
Z kultur uzyskanych w ASPW (ISO) zaszczepić za pomocą pętli mikrobiologicznej powierzchnię płytki agarowej TCBS (CM0333) i drugiej opcjonalnej pożywki do selektywnej izolacji w celu uzyskania pojedynczych kolonii.
Inkubować płytki w 37 ° C przez 24 ± 3 godziny (lub odpowiednio dla drugiego opcjonalnego podłoża).
Zbadaj płytki pod kątem obecności typowych kolonii * przypuszczalnie patogennego Vibrio spp. Wybierz 5 typowych kolonii do podhodowli na agarze z solą fizjologiczną, a następnie potwierdź biochemicznie.
Do wykrywania gatunków innych niż Vibrio parahaemolyticus i Vibrio cholerae
Poniżej znajduje się przegląd ISO / TS 21872-2: 20072 - Horyzontalna metoda wykrywania potencjalnie enteropatogennego Vibrio spp. Część 2: Wykrywanie gatunków innych niż Vibrio parahaemolyticus i Vibrio cholerae. Przygotuj próbki zgodnie z ISO 6887 (odpowiednia część) 5, ISO 72186 i ISO 82617.
Dodaj xg próbki do 9 x ml lub 9 x g ASPW (ISO) w temperaturze otoczenia.
Inkubować przez 6 ± 1 godzinę w temperaturze 41,5 ± 1 ° C dla świeżych produktów lub 37 ± 1 ° C dla głęboko mrożonych / solonych produktów.
Usunąć 1 ml inkubowanego podłoża i zaszczepić świeżym 10 ml alkalicznej wody peptonowej soli peptonowej (ISO) i inkubować przez 18 ± 1 godzinę w 37 ± 1 ° C.
Z kultur uzyskanych w ASPW (ISO) zaszczepić za pomocą pętli mikrobiologicznej powierzchnię płytki agarowej TCBS (CM0333) i drugiej opcjonalnej pożywki do selektywnej izolacji w celu uzyskania pojedynczych kolonii.
Inkubować płytki w 37 ° C przez 24 ± 3 godziny (lub odpowiednio dla drugiego opcjonalnego podłoża).
Zbadaj płytki pod kątem obecności typowych kolonii † przypuszczalnie patogennego Vibrio spp. Wybierz 5 typowych kolonii do podhodowli na agarze z solą fizjologiczną, a następnie potwierdź biochemicznie.
† Patrz interpretacja ISO / TS 21872-1 i 2: 20071 lub wpisy ręczne Oxoid dla CM0333 (i wpisy dla innych opcjonalnych drugich mediów, zależnie od przypadku), aby interpretować typ kolonii.
