BAIRD-PARKER AGAR BASE (RPF)
Kod: CM0961
nowy ulepszony podstawowy nośnik do użytku z suplementem RPF (SR0122). Jest to zgodne z ISO 6888 część 21 w celu wyliczenia gronkowców koagulazo-dodatnich.
Typowa formuła * gm / litr
Trzustkowe trawienie kazeiny 10,0
Ekstrakt z mięsa 5.0
Pirogronian sodu 10,0
Ekstrakt drożdżowy 1.0
Glicyna 12,0
Chlorek litu 5.0
Agar 20,0
pH 7,2 ± 0,2 @ 25ºC
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 6,3 g bazy agarowej Baird-Parker (RPF) w 90 ml wody destylowanej. Doprowadzić do wrzenia, aby całkowicie się rozpuściły. Sterylizuj w autoklawie w temperaturze 121ºC przez 15 minut. Ochłodzić do 48ºC i dodać 1 fiolkę SR0122A, odtworzoną zgodnie z instrukcją. Dobrze wymieszaj i zalej talerze.
N.B .: Bazę agarową Baird-Parker (RPF) należy stosować wyłącznie z suplementem RPF SR0122
Opis
Staphylococcus aureus to Gram-dodatni coccus zdolny do wytwarzania enterotoksyny, która może wywoływać zatrucie pokarmowe. Organizmy mogą występować w małych ilościach w wielu produktach spożywczych, a jeśli pozwolą się namnażać bez kontroli, mogą wytwarzać enterotoksyny o wysokiej odporności na ciepło. Zdolność Staphylococcus aureus do wytwarzania lecytynazy i lipazy jest znana od wielu lat, a wykrywanie tych enzymów w podłożu żółtkowym stało się szeroko stosowaną procedurą identyfikacji tego organizmu. Jego zdolność do wytwarzania koagulazy przy użyciu podobnego podstawowego preparatu umożliwia diagnozę potwierdzającą z włączeniem osocza królika do podłoża podstawowego.
Agar z fibrynogenu w osoczu królika (RPF) oparty jest na preparacie opisanym przez Beckersa i in. Pożywka ta jest modyfikacją pożywki Bairda-Parkera i jest zalecana do selektywnej izolacji, liczenia i potwierdzania Staphylococcus aureus z żywności i innych próbek3. Preparat agarowy RPF zachowuje bazę agarową Baird-Parker, która została specjalnie opracowana w celu reanimacji uszkodzonych komórek4. Pożywka ta różni się od pożywki Bairda-Parkera tym, że emulsję żółtka jaja zastąpiono fibrynogenem, osoczem królika i inhibitorem trypsyny. Fibrynogen dodano w celu wzmocnienia reakcji koagulazy w agarze RPF5. Stwierdzono, że dodanie osocza królika jest bardziej specyficzne dla aktywności krzepnięcia w porównaniu z innymi źródłami osocza2. Dodano inhibitor trypsyny, aby zapobiec fibrynolizy.
Suplement RPF (SR0122) został zmodyfikowany pod jednym względem w stosunku do pierwotnego preparatu, ponieważ zawartość tellurytu potasu została czterokrotnie zmniejszona, z 0,01% do 0,0025% w / v. Zmniejszenie to było konieczne, ponieważ odkryto w laboratorium Oxoid, że niektóre szczepy Staphylococcus aureus były wrażliwe na telluryn potasu, gdy zastosowano je w stężeniu 0,01% w / v w agarze RPF6. Stwierdzono, że ta modyfikacja agaru RPF zapewnia porównywalny wzrost i selektywność do tej uzyskanej na pożywce Baird-Parker (CM0275 lub CM1127 i SR0054). Poprawiona wydajność agaru RPF została również potwierdzona przez inne laboratoria7,8. Zmniejszenie stężenia tellurynu potasu w agarze RPF powoduje, że szczepy Staphylococcus aureus tworzą białe, szare lub czarne kolonie, które są otoczone nieprzezroczystą otoczką wytrącania, tj. Reakcją koagulazy.
Technika
Metoda posiewu powierzchniowego
Przygotuj płytki agarowe RPF zgodnie z instrukcją.
Przetwórz próbkę żywności w stomacher lub blenderze Waring, używając zalecanej wielkości próbki i rozcieńczalnika.
Oddzielne płytki zaszczepia się 0,1 ml przygotowanych próbek, a następnie ich dziesiętne rozcieńczenia.
Inkubować w temperaturze 35 ° C lub 37 ° C i badać po 24 i 48 godzinach inkubacji.
Policz wszystkie kolonie, które otaczają nieprzejrzystą aureolę opadów. Nie ograniczaj liczby do czarnych kolonii.
Podać jako liczbę izolowanych gronkowców koagulazo-dodatnich na gram jedzenia.
Metoda nalewania
Przygotuj agar RPF zgodnie z zaleceniami i trzymaj w temperaturze 48 ° C.
Przetwórz próbkę żywności w stomacher lub blenderze Waring, używając zalecanej wielkości próbki i rozcieńczalnika.
Dodaj 1 ml przygotowanej próbki (początkowa zawiesina i kolejne rozcieńczenie dziesiętne) do każdej jałowej szalki Petriego.
Dodaj aseptycznie 20 ml sterylnego agaru RPF i przygotuj płytki do nalewania.
Inkubować w 35 ° C lub 37 ° C i badać po 24 do 48 godzin.
Policz wszystkie kolonie, które otaczają nieprzejrzystą aureolę opadów.
Podać jako liczbę izolowanych gronkowców koagulazo-dodatnich na gram jedzenia.
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w 10-30 ° C, a dodatek RPF poniżej 0 ° C. Zużyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane talerze pożywki najlepiej stosować świeżo przygotowane 1,2.
Wygląd
Medium odwodnione: słomy, sypki proszek
Przygotowane medium: żel w kolorze słomy
