PODSTAWA AGAR BRILLIANCE SALMONELLA
Kod: CM1092
Agar Brilliance ™ Salmonella (poprzednio OSCM II) jest stosowany do produkcji selektywnego podłoża do domniemanej identyfikacji i różnicowania gatunków Salmonella.
Typowa formuła * gm / litr
Mieszanka Inhibigen ™ 14
Mieszanka chromogenna 25
Agar 15
pH 7,3 † ± 0,1 @ 25ºC
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
† pH suplementowanej pożywki
Agar Brilliance Salmonella to pożywka izolacyjna stosowana w metodzie szybkiej hodowli Oxoid Salmonella Precis. Aby uzyskać informacje, wystarczy pobrać arkusz danych Agill Salmonella Agar (1 MB) lub arkusz danych Salmonella Precis (1396 KB) w formacie PDF. Potwierdź przygotowane kody mediów u lokalnego dostawcy.
Sposób użycia
Zawiesić 27 g bazy agarowej Brilliance Salmonella w 500 ml wody destylowanej. Dodaj zawartość 1 fiolki Selektywnego suplementu Salmonella, ponownie zawieszając zgodnie z zaleceniami. Dobrze wymieszaj i wysterylizuj, doprowadzając do wrzenia z częstym mieszaniem. Schłodzić do około 50ºC, dobrze wymieszać i wlać do sterylnych szalek Petriego.
UWAGA: Bardzo ważne jest, aby dodatek selektywny był dodawany przed ogrzewaniem. Przygotowując objętości większe niż 1 litr, skontaktuj się z pomocą techniczną Oxoid w celu uzyskania wskazówek.
Opis
Związek Inhibigen ™ składa się z dwóch składników, połączonych razem wiązaniem, które może być rozszczepione tylko przez określony enzym. Po związaniu, związek będący inhibitorem nie jest toksyczny i dlatego może istnieć w pożywce bez uszkadzania mikroorganizmów. Po wejściu do komórki wiązanie zostanie odcięte, jeśli obecny będzie enzym docelowy. Gdy wiązanie jest rozszczepiane, cząsteczka inhibitora jest uwalniana i zaburza syntezę ściany komórkowej, powodując śmierć organizmu. Gdy komórki umierają i ulegają lizie, wolny inhibitor jest uwalniany, ale nie może być wchłaniany przez inne komórki, co powoduje ukierunkowane hamowanie. Inhibigen w Agar Salmonella Brilliance atakuje Escherichia coli. Nowobiocyna i cefsulodyna, przedstawione w postaci liofilizowanego suplementu (SR0194), są dodawane do pożywki w celu zahamowania wzrostu innej konkurującej flory, takiej jak Proteus spp. i Pseudomonas spp.
Różnicowanie Salmonelli od innych organizmów, które rosną na Agar Salmonella Brilliance osiąga się poprzez włączenie dwóch chromogenów, które również celują w określone enzymy: esterazę kaprylanową i ß-glukozydazę. Esteraza kaprylanowa jest enzymem obecnym we wszystkich samonellach, a także w niektórych gatunkach Klebsiella, Enterobacter i Proteus1. Organizmy posiadające esterazę kaprylanową rozszczepiają chromogen, uwalniając nierozpuszczalny purpurowy chromofor. W miarę wzrostu komórek chromofor gromadzi się i tworzy kolonię w kolorze fioletowym. Niektóre Enterobacteriaceae, w tym Klebsiella i Enterobacter, ale nie Salmonella, mają ß-glukozydazę2. Jeśli te organizmy rosną, utworzą niebieskie lub ciemnoniebieskie kolonie, nawet jeśli są pozytywne pod względem esterazy, co ułatwia ich odróżnienie od fioletowych kolonii Salmonella.
Technika
Testowanie próbek żywności
Agar Brilliance Salmonella można stosować do testowania próbek klinicznych (kału), bezpośrednio lub zgodnie z odpowiednim protokołem wzbogacania. Można go również stosować do próbek żywności i próbek środowiskowych po różnych procedurach wzbogacania, np. ISO, NMKL, FDA, HPA itp. W zależności od metody agar Brilliance Salmonella można posmarować bulionem wzbogacającym próbkę lub po inkubacji. Płytki następnie inkubuje się w 37 ° C przez 24 ± 3 godziny. Salmonella produkuje fioletowe kolonie.
Poniższa metoda jest streszczeniem ISO 6579: 2002 + A1: 20073 ilustrującym, w jaki sposób można stosować Agar Salillella Salillella wraz z podłożem XLD, stosując tę metodę:
Dodaj 25 g próbki żywności do 225 ml buforowanej wody peptonowej i żołądka przez co najmniej 30 sekund, aby wymieszać próbkę
Inkubuj bulion w 37ºC przez 18 ± 2h
Delikatnie wstrząsnąć torebkę, a następnie za pomocą pipety zaszczepić 1 ml 10 ml bulionu MKTTn i 0,1 ml 10 ml bulionu RVS. Inkubować bulion MKTTn w 37ºC przez 24 ± 3 godziny i bulion RVS w 41,5ºC przez 24h ± 3 godziny
Za pomocą pętli mikrobiologicznej zaszczepić każdy bulion na jednej płytce agarowej XLD i jednej płytce agarowej Brilliance Salmonella, uzyskując w sumie 4 płytki.
Inkubować płytki w 37 ° C przez 24 godziny ± 3 godziny
Potwierdź przypuszczalne czerwone kolonie czarnymi centrami z XLD i fioletowymi koloniami z Brilliance Salmonella Agar jako Salmonella spp, stosując odpowiednie metody biochemiczne i serologiczne. Patrz ISO 6579: 2002 + A1: 20073.
Następujące produkty Oxoid mogą być przydatne do potwierdzenia przypuszczalnej identyfikacji Salmonelli: Agar Odżywczy (CM0003), Agar TSI (CM0277), Agar Mocznikowy (CM0053 i SR0020K), Medium Dekarboksylazy Lizyny (CM0308), Metyloczerwony Voges-Proskauer (MRVP) Medium (CM0043), bulion sojowy Tryptone (CM0129), aglutynujące surowice (kody - patrz lista produktów Oxoid); Zestaw testowy do lateksu Oxoid Salmonella (DR1108), Microbact (kody podano na liście produktów Oxoid); O.B.I.S. Salmonella (ID0570). Skontaktuj się z lokalnym
