AGFIXIME RHAMNOSE SORBITOL MACCONKEY AGAR
(Baza agaru CR-SMAC)
Kod: CM1005
Selektywne, różnicowe podłoże oparte na agarze Sorbitol MacConkey z dodatkiem ramnozy i cefiksymu. Pożywka ta zapewnia selektywną bazę z ulepszonym różnicowaniem Escherichia coli O157.
Typowa formuła * gm / litr
Pepton 20,0
Sorbitol 10,0
Sole żółciowe nr 3 1.5
Chlorek sodu 5.0
Ramnoza 5.0
Neutralny czerwony 0,03
Krystaliczny fiolet 0,001
Agar 15,0
pH 7,1 ± 0,2 w 25 ° C
* Dostosowane zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia standardów wydajności
Sposób użycia
Zawiesić 28,25 g w 500 ml wody destylowanej. Dobrze wymieszaj i sterylizuj w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut. Ochłodzić do około 50 ° C i aseptycznie dodać zawartość jednej fiolki suplementu Cefixime Suplement SR0191, odtworzonego zgodnie z instrukcją. Dobrze wymieszaj i przelej do sterylnych szalek Petriego.
Aby odtworzyć suplement Cefixime, dodaj aseptycznie 2 ml jałowej wody destylowanej do 1 fiolki suplementu. Wymieszaj delikatnie, aby rozpuścić.
Opis
Wykazano, że dodanie ramnozy do agaru Sorbitol MacConkey (SMAC) pomaga w odróżnieniu Escherichia coli O157 od flory tła. Około 60% nie-sorbitolowej fermentacji Escherichia coli serogrup innych niż fermentacyjna O157 ramnoza (Sheffield PHL, dane niepublikowane). Wykazano, że cefiksym obniża poziom konkurującej flory, w szczególności Proteus spp., Które często stanowią dużą liczbę kolonii niesfermentujących1.
Escherichia coli O157 zwykle nie fermentują sorbitolu ani ramnozy, więc pojawią się jako kolonie w kolorze słomy. Jednak ramnoza jest fermentowana przez większość Escherichia coli ujemnych pod względem sorbitolu w innych serogrupach. Kolonie te będą różowe / czerwone i nie będą liczone jako domniemane kolonie Escherichia coli O1571.
Cefiksym ramanoza sorbitol MacConkey Agar (CR-SMAC) jest wybiórczym i zróżnicowanym podłożem do wykrywania Escherichia coli O157. Próby terenowe wykazały, że stosowanie CR-SMAC w połączeniu z bardziej selektywnym CT-SMAC prowadzi do wyższego ogólnego odzysku Escherichia coli O157 z bulionów wzbogacających2,3.
Technika
Zaszczepić płytki zawiesiną próbki. do produkcji oddzielnych kolonii. Inkubować przez 24 godziny w temperaturze 35–37 ° C.
Zbadaj płytki pod kątem kolonii w kolorze słomy; są to organizmy negatywne dla sorbitolu i ramnozy. Potwierdź podejrzane Escherichia coli O157 za pomocą testu lateksowego E. coli O157 DR0620 lub Dryspot E. coli O157 DR0120.
Mogą również wystąpić kolorowe kolonie:
sorbitol dodatni
różowy do czerwonego
ramnoza dodatnia
różowy do czerwonego
Warunki przechowywania i okres ważności
Przechowywać odwodnione podłoże w temperaturze 10–30 ° C i użyć przed datą ważności na etykiecie.
Przygotowane podłoże przechowuj do 2 tygodni w temperaturze 2–8 ° C.
Wygląd
Pożywka odwodniona: słomy różowy, sypki proszek
Przygotowane medium: Żel w kolorze czerwonym
